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人线粒体拷贝数检测
  • 人线粒体拷贝数检测技术是一种分子生物学方法,用于测定细胞内线粒体DNA(mtDNA)的拷贝数。线粒体是细胞内的半自主细胞器,其主要功能是产生能量。线粒体DNA拷贝数的变化与多种疾病、衰老和细胞健康状态相关,因此这项技术对于医学研究和诊断具有重要意义。

    我们采用了目前文献中常用的qPCR检测方法,通过以核DNA (nDNA) 为基准对人线粒体DNA (mtDNA) 拷贝数进行相对定量,使用多对引物,对同一个检测样品进行qPCR检测,根据mtDNA和nDNA的Ct值差,对mtDNA的拷贝数进行相对定量。

    这项技术在医学研究中被广泛应用,例如,用于诊断线粒体疾病、评估药物的效力、研究衰老过程、母系遗传研究等。线粒体拷贝数检测具有高度的精确性和灵敏度,能够提供关于线粒体功能和细胞健康状态的重要信息,有助于深入理解线粒体在生物学和医学领域中的作用。

    技术优势:

    本技术灵敏度高,特异性好,操作简单快速,检测通量灵活,适用于各种人类样本的线粒体拷贝数定量。


  • 1. 样本类型:Total DNA; 

    2. 样品需求量:Qubit检测,要求浓度Qubit ≥ 10ng/ul,总量 ≥ 300ng;

    3. 样本完整度:琼脂糖凝胶电泳检测基因组DNA完整性,要求电泳条带清晰可见,无明显降解,且无RNA污染;

    4. 样品需要低温保存和运输。




  • 本方法采用Sybrgreen方法利用荧光实时定量PCR检测系统对预定的4个基因:线粒体2个基因+2个内参核基因;每个基因做3次重复。

    分析内容

    1. 线粒体基因与内参核基因位点的扩增曲线、熔解曲线图;

    2. 线粒体基因与内参核基因位点的Ct值原始数据;

    3. 线粒体相对拷贝数的数据分析及柱状图展示。




  • 文章题目

    期刊名

    影响因子

    发表时间

    Comprehensive molecular characterization of mitochondrial genomes in human cancers(人类癌症线粒体基因组的综合分子特征)

    Nat Genet.

    27.603

    2020-4-27

    Mitochondrial DNA Copy Number and Incident Heart Failure: The Atherosclerosis Risk in Communities (ARIC) Study(线粒体基因拷贝数与突发性心脏衰竭:社群动脉粥样硬化风险(ARIC)研究)

    Circulation

    23.603

    2020-6-2

    Increased telomere length and mtDNA copy number induced by multi-walled carbon nanotube exposure in the workplace(工作场所的多壁碳纳米管物质暴露会导致工人的端粒长度和线粒体DNA拷贝数增加)

    J Hazard Mater.

    9.038

    2020-7-15

    Prenatal exposure to benzotriazoles and benzothiazoles and cord blood mitochondrial DNA copy number: A prospective investigation(产前暴露于苯并三唑和苯并噻唑与脐带血线粒体基因拷贝数:一项前瞻性研究)

    Environ Int.

    7.577

    2020-7-9

    Influence of metals from e-waste dismantling on telomerelength and mitochondrial DNA copy number in people living near recycling sites(电子垃圾拆解产生的金属对生活在回收场所附近人群端粒长度和线粒体基因拷贝数的影响)

    Environ Int.

    7.577

    2020-5-10

    Association of particulate matter air pollution with leukocyte mitochondrial DNA copy number(大气颗粒物污染与白细胞线粒体基因拷贝数的关系)

    Environ Int.

    7.577

    2020-5-7

    The associations between prenatal exposure to polycyclic aromatic hydrocarbon metabolites, umbilical cord blood mitochondrial DNA copy number, and children's neurobehavioral development(产前暴露于多环芳烃代谢物、脐血线粒体基因拷贝数与儿童神经行为发育的关系)

    Environ Pollut.

    6.792

    2020-4-16

    Telomere Length and mtDNA Copy Number in Human Cystathionine β-synthase Deficiency (人胱硫醚β-合酶缺乏症的端粒长度和mtDNA拷贝数研究)

    Free Radic Biol Med.

    6.17

    2020-8-5

    Urinary polycyclic aromatic hydrocarbon metabolites, peripheral blood mitochondrial DNA copy number, and neurobehavioral function in coke oven workers (焦炉工人尿中的多环芳烃代谢物、外周血线粒体基因拷贝数和神经行为功能研究)

    Chemosphere

    5.778

    2020-7-25

    Anomalous AMPK-regulated angiotensin AT1R expression and SIRT1-mediated mitochondrial biogenesis at RVLM in hypertension programming of offspring to maternal high fructose exposure(在母体高果糖暴露下的子代高血压程序性发生中AMPK调节的血管紧张素AT1R异常表达和SIRT1介导的RVLM线粒体生物发生)

    J Biomed Sci.

    5.762

    2020-5-23

    MicroRNA-204-5p modulates mitochondrial biogenesis in C2C12 myotubes and associates with oxidative capacity in humans(MicroRNA-204-5p调节C2C12肌管中的线粒体生物发生及与人类的氧化能力关系)

    J Cell Physiol.

    5.546

    2020-5-26

    Tfam Knockdown Results in Reduction of mtDNA Copy Number, OXPHOS Deficiency and Abnormalities in Zebrafish Embryos(Tfam敲除导致斑马鱼胚胎中mtDNA拷贝数减少、OXPHOS缺乏和异常) 

    Front Cell Dev Biol.

    5.201

    2020-6-12

    Biomarkers of aging and lung function in the normative aging study(标准老化研究中的老化和肺功能生物标志物)

    Aging

    4.831

    2020-6-19

    The Study of Genetic Susceptibility and Mitochondrial Dysfunction in Mesial Temporal Lobe Epilepsy(颞叶内侧癫痫遗传易感性和线粒体功能障碍的研究)

    Mol Neurobiol.

    4.5

    2020-7-6

    P-cresyl sulfate causes mitochondrial hyperfusion in H9C2 cardiomyoblasts(硫酸对甲酚导致H9C2成心肌细胞线粒体高融合)

    J Cell Mol Med.

    4.486

    2020-7-8

    Insulinemic Potential of Lifestyle Is Inversely Associated with Leukocyte Mitochondrial DNA Copy Number in US White Adults(美国成年白人生活方式的胰岛素潜能与白细胞线粒体基因拷贝数成反比)

    J Nutr.

    4.281

    2020-8-1

    Associations of mitochondrial DNA copy number and deletion rate with early pregnancy loss(线粒体基因拷贝数和缺失率与早期流产的关联)

    Mitochondrion

    3.992

    2020-7-29

    Negative Association between Caloric Intake and Estimated Glomerular Filtration Rate in a Chinese Population: Mediation Models Involving Mitochondrial Function(中国人群热量摄入与估计肾小球滤过率之间的负相关:涉及线粒体功能的中介模型)

    Gerontology

    3.54

    2020-7-14






  • 1、 不同组织和细胞类型的样本是否存在差异?

    答:是的,不同样本来源可能在线粒体拷贝数方面存在差异,因此需要考虑样本来源对结果的潜在影响。


    2、 线粒体异质性是否会影响检测结果?

    答:是的,线粒体拷贝数可能在细胞内不均匀分布,这种线粒体异质性可能会影响拷贝数检测的结果。此外,线粒体拷贝数可以受到环境因素和遗传变异的影响,因此需要谨慎考虑这些因素。





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