技术服务
Technical Service
RNA qPCR检测
  • RNA qPCR检测即RNA定量PCR技术,是基因表达水平定量的金标准,也是转录组测序后对表达水平验证的必不可少的环节。RNA qPCR检测主要包括三个步骤,RNA的提取与质控、逆转录为cDNA、以及实时荧光定量PCR实验,

    技术路线:

    微信44图片_20231226163514.png

                                     




  • 样品要求

    常规mRNA定量

    a) 需求量:Total RNA总量> 1 μg;浓度≥ 50 ng/μL

    b) 纯度:OD260/280介于1.8-2.2之间

    c) 完整度:RNA无明显降解,琼脂糖凝胶电泳28S/18S条带清晰可见

    常规lncRNA定量

    a) 需求量:Total RNA总量> 1 μg;浓度≥ 50 ng/μL

    b) 纯度:OD260/280介于1.8-2.2之间

    c) 完整度:RNA无明显降解,琼脂糖凝胶电泳28S/18S条带清晰可见

    常规miRNA定量

    a) 需求量:Total RNA总量> 500 ng;浓度≥ 100 ng/μL

    b) 纯度:OD260/280介于1.8-2.2之间

    c) 完整度:RNA无明显降解,琼脂糖凝胶电泳28S/18S条带清晰可见

    定量方法

    ABI 7300/7900荧光定量PCR仪,SYBR Green相对定量法

    数据质量

    Ct < 30;溶解曲线单一;两重复平行性好




  • 分析与结果:

    基本分析

    1) 靶基因与内参基因扩增曲线

    2) 靶基因与内参基因溶解曲线

    3) 靶基因与内参基因Ct值原始数据(SDS文件)

    4) 靶基因相对表达量分析数据及柱状图展示




copyright © 2008-2023 天昊生物 reserved. ICP备案序号:沪ICP备18028200号-1沪公网安备 31011502016782号