目的区域测序是指针对感兴趣的目标区域富集后进行大规模测序。目前，天昊生物主要提供两种目的区域富集方法：定制液相芯片富集和FastTarget®多重目的区域富集。

FastTarget®技术针对目的区域设计多重PCR扩增体系，对研究者感兴趣的基因组区域进行捕获富集。一个扩增反应体系可以完成16-20个PCR反应，直接获得4kb左右的基因组区域。该技术方法非常成熟，方法快速、操作简单，无需复杂的建库过程。后续，利用二代测序平台对目的区域进行测序，进而对所获得测序数据进行生物信息学分析，研究感兴趣的序列及序列差异。该方法非常适合<200 kb的多个候选基因外显子或连续区域富集二代测序。

技术路线：

技术优势：

•针对性强：比起全基因组及全外显子组水平的研究，目的区域测序更具有针对性，可以依赖大量的前期研究成果，获得候选染色体区域或者基于生物通路的大量候选基因；

•费用低：目的待测区域较小，可对数百个样品进行快速测序，大大降低了研究成本；

•信息量大：比起目的区域或者候选基因单倍型标签SNP分型的研究策略，目的区域测序可以完整覆盖整个基因区域，不仅可以获得高频SNP的分型数据，而且还可以发现低频的和个体特有的变异；

•效率高：比起使用Sanger法的候选基因测序方法，基于二代测序技术的目的区域测序更加快速、高效；

•高精度：目的区域的高测序深度保证了更准确的测序结果。

样品需求量：Qubit检测，要求浓度≥ 20 ng/μL，总量≥ 2 μg（多重PCR）

样本纯度：无色透明，OD260/280 = 1.7~2.0；OD260/230≥ 2.0

样品完整度：琼脂糖电泳检测要求主条带清晰，无明显弥撒及拖尾，无RNA污染

样品保存和运输要求：-20°C保存，冰袋运输

数据分析内容：

Nature Communications ：全外显子组和靶向测序确定ROBO1和ROBO2突变是骨髓增生异常综合征的进展相关驱动因素

骨髓增生异常综合征（MDS）的进展机制尚不清楚。这项研究在6例（6/16，37.5%）伴有疾病进展的MDS成对患者中，使用全外显子组和靶向测序，将ROBO1和ROBO2确定为新的与进展相关的体细胞突变。进一步的深度测序在193名MDS患者队列中检测到20例（10.4%）ROBO突变。此外，在进展或携带ROBO突变的患者中，经常观察到ROBO1和ROBO2的拷贝数丢失和杂合性缺失。

图 ROBO1和ROBO2基因靶向测序

目的区域富集测序高分合作文章：

1.FastTarget®目的区域富集测序适用于多大的区域？

答：该方法非常适合< 200kb的多个候选基因外显子或连续区域富集测序。

2.FastTarget®目的区域富集测序主要基于什么技术原理？

答：该方法主要针对目的区域设计多重PCR扩增体系，对研究者感兴趣的基因组区域进行捕获富集。一个扩增反应体系可以完成16-20个PCR反应，直接获得4kb左右的基因组区域。

3.FastTarget®目的区域富集测序主要应用在哪些方面？

答：该技术非常适合全基因组或者全外显子组测序后针对候选目的区域的测序验证，适合肿瘤或者其它复杂疾病的基因组测序验证环节。