外泌体（exosome）是真核细胞向外分泌的微型囊泡，直径在30至120 nm之间，广泛存在于血液、尿液、唾液、脑脊液等体液中。血浆和外泌体类样本中的RNA除了含量较高的miRNA之外，还存在mRNA、lncRNA、circRNA等长链RNA，某些长链RNA与特定疾病具有较强的相关性，具有较高科研价值。

该服务采用成熟的技术富集不同体液来源的外泌体，对体液或者体液中的外泌体组分进行RNA抽提、文库构建以及二代测序，可同时分析同一样本中的mRNA、lncRNA、circRNA，同时可以结合miRNA测序数据进行分析，明确不同转录本之间的共表达和相互调控关系。

技术路线:

技术优势:

•Total RNA直接建库，保留了完整的RNA种类信息；

•链特异性文库，可以保留转录本的链信息，更准确检测反义RNA；

•可以联合miRNA数据，分析mRNA、lncRNA、circRNA以及miRNA的共调控关系。

样品类型：无细胞DNA或RNA污染的、血浆类或者血浆外泌体类样本来源的Total RNA

样品需求量：血浆样本Qubit microRNA检测，要求浓度 ≥ 1 ng/μL；总量 ≥ 20 ng；外泌体样本Agilent 2100 Bioanalyzer检测，要求浓度 ≥ 0.5 ng/μL；总量 ≥ 10 ng

样品RNA片段分布：Agilent 2100 Bioanalyzer检测，要求< 200 nt片段占总RNA的比例>60%，且500nt~4000nt之间无明显可见片段

数据分析内容:

结果展示:

表1 不同粒径颗粒的占比

图 ZetaView检测血浆外泌体粒径分布

左图为粒径与浓度分布图；右图为量测录像的影片截图

图 样本间差异表达的已知miRNA火山图

图 差异基因KEGG富集散点图

Molecular Cancer：外泌体circLPAR1通过METTL3-eIF3h相互作用抑制BRD4在结直肠癌诊断和肿瘤发生中的作用

为了表征结直肠癌中失调的环状RNA，对52对结直肠癌肿瘤和对照进行了RNA-Seq，观察到14221个环状RNA（图A）。在这些环状RNA中，大多数小于500 nt（图B），超过70%的环状RNA起源于蛋白质编码外显子，其次是内含子和基因间区（图C）。进一步筛选获得5个circRNAs在结直肠肿瘤组织中的表达与在对照中的表达相比显著降低（图D-E）。此外，使用exoRBase数据库对外泌体中的circRNAs进行了注释，发现了3个外泌体circRNAs（图F）。

图 组织circRNA表征及外泌体circRNA发现