免疫组库（Immune Repertoire, IR）是指个体在任何特定时间点其循环系统中所有功能多样性B淋巴细胞和T淋巴细胞的总和。T细胞和B细胞分别通过其表面的T细胞受体（T cell receptor, TCR）和 B细胞受体（B cell receptor, BCR）来识别和结合抗原，介导机体的细胞免疫和体液免疫，进而发挥清除病原体或体内肿瘤细胞的功能。BCR和TCR在结构上具有相似的特征，均为异源二聚体。其中BCR由两条重链（H）和两条轻链（L）组成，TCR由α链和β链组成，每条链又可分为V（Variable）、D（Diversity）、J（Joining）、C（Constant） 区。在VDJ区域中，决定BCR和TCR的抗原特异性关键的区域是3个互补决定区 （complementarity determining regions, CDR），其中以CDR3的可变性高，因此，通常免疫组库研究主要针对该区域的序列。

本技术借助于SMART扩增和多重PCR技术，以RNA为起始样本，特异性扩增BCR重链（IgA, IgD, IgE, IgG, IgM）和轻链（IgK, IgL），以及TCR α（TRA）和 β（TRB）链，通过高通量测序和数据分析，分别获得上述同种型的CDR3种类和比例信息。

技术路线

技术优势

数据分析内容

结果展示

图 BCR CDR3碱基长度分布图

图 BCR测序不同亚型占比

图 BCR比对结果示例图

1.免疫组库检测适用于什么物种？

答：目前只适用于人。

2.免疫组库可以检测哪些抗体亚型，可以只检测BCR或者TCR吗？

答：体系包括BCR重链（IgA, IgD, IgE, IgG, IgM）和轻链（IgK, IgL），以及TCR α（TRA）和 β（TRB）链的检测，可以根据样本情况和研究目的选择检测内容，选择BCR或TCR的一种或多种亚型进行检测。

3.可检测的样本类型有哪些，建议起始量多少？

答：可检测的样本类型有PBMC，分选的B细胞及B细胞亚型（仅检测BCR）、T细胞及T细胞亚型（仅检测TCR），通常PBMC需要100ng total RNA起始，建议提供≥2×105个细胞，富集的B细胞或T细胞10ng total RNA起始，建议提供≥2×104个细胞。

4.测序可以获得V(D)J全长序列吗？

答：文库插入片段约450-600bp，包括基因V(D)J全长序列，由于Illumina测序平台读长的限制，无法获得全长序列。如需全长序列，可考虑采用三代平台进行测序。