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AccuITS™ 真菌绝对定量测序
  • 昊为泰生物自主研发的创新技术--AccuITS™真菌绝对定量测序,是通过向样品DNA中添加人工合成的不同拷贝数的spike-in 内标序列,之后进行ITS扩增子文库构建、测序,再根据spike-in 内标的ITS扩增子reads数及其绝对拷贝数绘制出标准曲线,后就成功获得样品中OTU代表序列对应的真菌物种绝对拷贝数。

    所以简单的说相对定量是由测序reads得到OTU,然后经过抽平后再进行生信分析。而绝对定量是在获得测序reads,得到OTU后,不抽平,而是直接利用标准曲线换算成绝对拷贝数后进行分析。

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    试验及分析流程

    技术优势:

       • 一次检测,三套数据,结果更丰富;

       • 对样本的需求量要求低,避免因样本无备份等造成的无法检测情况;

       • 检测通量高,检测合格范围内各类菌种均可绝对定量;

       • 相对定量和绝对定量数据相互印证,减少传统相对定量假阳性问题;

       • 避免跨平台qPCR定量的系统误差;

       • 避免因样本DNA抽提等原因造成的PCR抑制剂残留对结果准确性的影响;

       • 避免qPCR等定量实验碰到的引物设计和优化难题。




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